2024新奧精準正版資料介紹了LCMS質譜儀的原理及結構。LCMS質譜儀是一種將液相色譜(LC)與質譜(MS)相結合的分析儀器,其原理是通過液相色譜將混合物分離成單個組分,然后利用質譜儀對每個組分進行質量分析和鑒定。結構上,LCMS質譜儀主要由液相色譜系統、質譜儀系統、數據處理系統等部分組成,各部分協同工作,實現對復雜樣品的快速、準確分析。該資料為相關領域的研究人員提供了有價值的參考。
液相色譜-質譜聯用儀(LC-MS)是一種高效的分析儀器,它將液相色譜(LC)和質譜(MS)聯用,能夠快速、準確地分析樣品中的化合物,LC-MS結合了液相色譜的高分離能力和質譜的高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對分子質量與結構信息的優點,在藥物分析、環境監測、食品安全等領域得到了廣泛的應用,本文將詳細介紹LC-MS質譜儀的原理及結構。
LC-MS質譜儀的原理
LC-MS質譜儀的原理基于液相色譜和質譜的原理相結合,通過液相色譜實現樣品的分離和純化,然后通過質譜實現化合物的鑒定和分析。
液相色譜部分
液相色譜部分主要由進樣系統、輸液系統、分離系統和檢測系統組成,樣品通過進樣器被引入到色譜柱中,色譜柱中的填料會根據不同化合物在固定填料中的分配系數不同,將樣品中的化合物分離出來,不同的化合物會在不同的時間點到達檢測器,從而實現化合物的分離和純化。
1、進樣系統:進樣裝置要求密封性好、死體積小、重復性好,保證中心進樣,進樣時對色譜系統的壓力、流量影響小,主要包括貯液器(用于貯存流動相)、輸液泵(高壓泵的輸出壓力一般在150~500 kg/cm2,流速在0.01~10 mL/min)、過濾器(用于過濾微小雜質)、脫氣裝置(若流動相中所含的空氣不除去,則流動相通過色譜柱時其中的氣泡受到壓力而壓縮,流出色譜柱后到檢測器時因常壓而將氣泡釋放出來,造成檢測器噪聲增大,使基線不穩,儀器不能正常工作)和梯度洗脫裝置(分為低壓梯度和高壓梯度兩種)。
2、分離系統:色譜柱是分離系統的核心部分,通過不同化合物在固定填料中的分配系數不同,實現化合物的分離。
3、檢測系統:液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、熒光檢測器和電化學檢測器等,在LC-MS系統中,質譜儀作為液相色譜的檢測器,具有更高的靈敏度和選擇性。
質譜部分
質譜部分主要由離子源、質量分析器、檢測器和真空系統組成,色譜柱分離出的化合物進入質譜部分,被離子源電離產生離子,然后進入質譜儀中的質量分析器,在質量分析器中,離子根據質量-電荷比(m/z)進行分離,不同m/z的離子會在不同時間到達檢測器,通過檢測不同時間到達的離子,可以得到化合物的質譜圖譜,從而確定化合物的分子結構和質量。
1、離子源:離子源是將樣品分子離子化的裝置,常見的離子源有電噴霧離子源(ESI)和大氣壓化學電離源(APCI)等。
電噴霧離子源(ESI):ESI是一種軟電離源,能使大質量的有機分子生成帶多電荷的離子,ESI的工作原理是將液滴變成蒸汽,產生離子發射的過程中形成的溶劑由液相泵輸送到ESI Probe,經其內的不銹鋼毛細管流出,這時給毛細管加2-4kv的高壓,由于高壓和霧化氣的作用,流動相從毛細管頂端流出時,會形成扇狀噴霧,使液滴生成含樣品和溶劑離子的氣溶膠,電噴霧離子化可分為形成帶電小液滴、溶劑蒸發和小液滴碎裂、形成氣相離子三個過程。
大氣壓化學電離源(APCI):APCI的離子化作用可以有經典APCI、離子蒸發和摩擦電APCI三種理論闡述,APCI適用于分析熱穩定的化合物,尤其是那些不易形成帶電液滴的化合物。
2、質量分析器:質量分析器是將離子按m/z分開的部分,常見的質量分析器有四極桿、離子阱、飛行時間(TOF)和傅立葉變換質譜等。
四極桿:四極桿內所包圍的空間存在雙曲線形電場,從離子源入射的加速離子穿過四極桿中的電場會受到電場作用,只有選定的m/z離子以限定的頻率穩定地通過四極桿濾質器,其他離子則碰到極桿上被吸濾掉,不能通過,四極桿濾質器結構緊湊、體積小、掃描速度快,適用于LC-MS聯用儀。
離子阱:離子阱可以存儲離子,待離子累積到一定數目后,升高環電極上的射頻電壓,離子按質量從高到低依次離開離子阱,被電子倍增監測器檢測。
飛行時間質量分析器:飛行時間質量分析器既不用電場也不用磁場,其核心是一個離子漂移管,離子在其中的飛行時間與離子的m/z的平方根成正比,飛行時間質量分析器具有較大的質量分析范圍和較高的質量分辨率,尤其適合蛋白等生物大分子分析。
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