摘要:澳門正版資料大全免費歇后語與質譜儀技術參數設置無直接關聯,但后者為一專業主題。質譜儀技術參數設置詳解通常涉及質量范圍、分辨率、靈敏度、掃描速度、離子源類型、檢測器類型及真空度等關鍵指標,這些參數的精確設置對質譜儀的性能和結果準確性至關重要。用戶需根據實驗需求及儀器型號,參考廠家提供的操作手冊進行細致調整。
質譜儀作為現代分析化學中的重要工具,廣泛應用于藥物研發、環境監測、食品安全、生物科學等領域,其技術參數的設置直接關系到實驗結果的準確性和可靠性,本文將詳細介紹質譜儀的主要技術參數及其設置方法,以期為相關領域的研究人員提供參考。
質譜儀的基本技術參數
質譜儀的技術參數眾多,主要包括分辨率、準確度、靈敏度、離子源、離子源溫度、離子化模式、離子源電壓、探針電壓等,這些參數的設置需要根據實驗目的和樣品特征進行細致調整。
1、分辨率
分辨率是指質譜儀區分兩個質量相近的離子的能力,通常以10%谷圖和50%峰寬(FWHM)來衡量,分辨率越高,同一物質采集的分子量的峰的精細程度越大,準確度越高,分辨率設置越高,掃描所需的時間越長,因此需要在分辨率和掃描速度之間找到平衡點,Thermo公司的Orbitrap系列儀器,一般一級分辨率設置在70000左右,能夠精確分辨小數點后兩位。
2、準確度
準確度指離子測量的準確性,通常用真實值和測量值之間的誤差來評價,單位ppm(part per million),準確度主要取決于質量分析器的性能和分辨率的設置,目前,對于常用的質譜儀如AB5600或Q Exactive等,質量分析器TOF或Orbitrap的誤差級別可達10ppm以下,實際中,質譜鑒定時常見的一級質量容差設置為20ppm,二級質量容差為0.1Da,這些設置已遠大于儀器的誤差范圍。
3、靈敏度
靈敏度是指檢測器對一定樣品量的信號響應值,即最少樣品量的檢出程度,對于純的標準物質而言,靈敏度可達到fmol級別,高的靈敏度不一定能檢測到目標蛋白,因為樣品本身信息量大,DDA模式中只有信號響應高的物質才能檢測到;肽段需要離子化才能采集數據,離子化效率低,可能在傳輸過濾中被過濾掉。
離子源及離子化參數設置
離子源是質譜儀捕捉和離子化樣品分子的關鍵部位,其參數設置直接影響離子化效率和質譜圖的質量。
1、離子源類型
離子源類型需要根據樣品性質選擇,常見的離子源包括電噴霧離子源(ESI)、大氣壓化學電離源(APCI)、基質輔助激光解吸電離源(MALDI)等,ESI適用于極性化合物,APCI適用于非極性化合物,MALDI則適用于固體樣品。
2、離子源溫度
離子源溫度影響離子受到能量的大小,高溫度能得到高強度的離子信號,但也可能導致峰的消失或加強,需要根據不同的樣品類別調節離子源溫度。
3、離子化模式
不同的離子化模式各有特點,需要根據樣品特征選擇,ESI適用于水溶液樣品,APCI適用于有機溶劑樣品,MALDI則適用于固體樣品。
4、離子源電壓
離子源電壓與樣品的離子化程度、峰形等因素有關,需要根據樣品性質進行調節,以獲得最佳的離子化效果和質譜圖質量。
5、探針電壓
探針電壓的選擇要遵循碰撞誘導解離思想,加大探針電壓可以提高碰撞效率,增強離子內部碰撞碎裂的概率,從而獲得更多的碎片離子信息。
質譜儀的其他重要參數
除了上述主要參數外,質譜儀還有一些其他重要參數,如low mass與high mass、背景噪聲消除、PIF和MID技術等,這些參數的優化也能顯著提高質譜儀的性能。
1、low mass與high mass
low mass和high mass是離子信號的兩個基本參數,它們的調節會對整個質譜掃描過程產生較大影響,通過調整這兩個參數的值,可以優化離子信號的穩定性和靈敏度。
2、背景噪聲消除
背景噪聲常常會影響數據的準確性和分析結果,利用自回歸模型對背景噪聲進行平滑化處理,可以有效地消除背景噪聲的影響,提高數據的準確性。
3、PIF和MID技術
PIF(Peak Intensity of Fragment ion)和MID(Mass Isotopomer Distribution)是離子信號的兩個基本參數,正確利用這兩個參數可以提高定量結果的準確性和靈敏度。
質譜儀的操作步驟
質譜儀的操作步驟包括開機、調諧、樣品分析、關機等,每一步都需要嚴格按照操作規程進行,以確保儀器的正常運行和實驗結果的準確性。
1、開機
打開氦氣鋼瓶總閥,確保使用高純氦氣,并調整氮氣輸出壓力至0.4-0.5Mpa,開啟氣相電源和質譜電源,注意密閉機械泵,然后啟動質譜,質譜開機后需抽真空2小時。
2、調諧
進入調諧與真空控制界面,選擇空氣與水檢查,確認系統無漏氣后,進行自動調諧,并保存
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